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顯微操作器(簡稱微操)是做什么用的?你知道顯微操作器有哪些種類嗎?該如何選擇?顯微操作用的針尖兒端如何處理?今天就為您一一講解。
什么是顯微操作?
顯微操作(micromanipulation)是指在光學(xué)顯微鏡或解剖鏡的可見視野內(nèi),操作者一邊觀察一邊使用微玻璃針、解剖刀、吸量管等器具,進行手術(shù)、解剖、注射等實驗操作。由于早期用于微小生物體的結(jié)構(gòu)解剖,故又稱顯微手術(shù)。
顯微操作器的用途有哪些?
目前,以細胞內(nèi)微注射和微灌注技術(shù)為基礎(chǔ)的玻璃針頭(Glass Needle,精細的玻璃微量毛細移液管)的使用,已經(jīng)在越來越多的實驗生物學(xué)研究領(lǐng)域中成為一項非常普遍的操作方法,比如在體外受精、轉(zhuǎn)基因中等等。描述這些技術(shù)比較恰當(dāng)?shù)脑拺?yīng)當(dāng)稱其為——顯微操作,因為這些操作是通過單個的或多個的筒狀玻璃微量移液管、準(zhǔn)確的定位裝置(顯微操作器)以及微量注射器或微量灌注器來在單個的細胞上進行的。
采用顯微操作已取得許多實驗成果,如分離出微生物或孢子或培養(yǎng)細胞,進行單細胞培養(yǎng);對生長點等施以顯微手術(shù),對其進行功能的研究;插入微電極,進行細胞·細胞間的電位差測量;將細胞核等細胞器進行摘除或移入而進行的生理學(xué)或遺傳學(xué)的實驗等??捎糜诩毎艘浦?、基因注入、胚胎切割等手術(shù),也可用于分離單個細胞。包括細胞器的移植;各種大分子物質(zhì)(包括DNA/片段或特定的基因、信使核糖核酸、蛋白質(zhì)、酶類、熒光抗體、染料等)向細胞、細胞核內(nèi)的顯微注射、異種精子向卵子內(nèi)的注射、哺乳動物胚泡的顯微注射;各種動物的卵子和胚胎、特別是體積極小的哺乳動物卵子和胚胎在體外培養(yǎng)條件下的顯微切割、胚胎細胞的交換、重組和聚集以及顯微輻射(即用微束紫外光或激光在顯微鏡下轟擊細胞內(nèi)的某一部分精細結(jié)構(gòu))等一系列技術(shù)。
這些技術(shù)的建立對于研究個體發(fā)生和細胞分化、核質(zhì)關(guān)系、細胞的結(jié)構(gòu)和生物大分子的功能、細胞的誘變與雜交、基因表達與發(fā)育調(diào)節(jié)、外源遺傳物質(zhì)對細胞、原生質(zhì)體或生物體的作用等方面均有重要作用。
有些顯微操作技術(shù)如胚胎切割、嵌合體制作,顯微注射外源基因以獲得轉(zhuǎn)基因動物等已開始應(yīng)用到大家畜上;細胞核移植已用于經(jīng)濟魚類的克隆。
什么是顯微操作器(micromanipulator)?
顯微操作器(簡稱微操)或稱顯微操縱器一種用來在顯微鏡下對細胞進行細微手術(shù)和注射的裝置,該裝置受機械或電子控制,通過人工操縱能正常運動,或把運動程序輸入微處理機,將玻璃毛細管尖兒端、 電極或探針等安裝在微操上, 每次以µm或nm進行移動。利用甚小的工具做抓、切、擠壓、注入、縮回等動作。
常用的顯微操作器有3種:手動顯微操作器、 手動/電動一體顯微操作器、以及電動顯微操作器
顯微操作器能夠用于體外受精、 膜片鉗實驗、 細胞外記錄、 顯微注射, 以及任何要求微小機械位移的場合
顯微操作的特點是直觀、定位準(zhǔn)確并可進行穩(wěn)定的三維操作。它使各類手術(shù)操作的度量水平比在肉眼和徒手條件下的操作提高了成百至上千倍。顯微鏡的高分辨率加上顯微工具及其三維驅(qū)動裝置以及微量注射液壓裝置等的高精密度,使顯微操作可達到很高的準(zhǔn)確度。分為顯微鏡下操作和解剖鏡下操作兩類。
顯微鏡下操作的設(shè)備:包括配有倒相和長焦距物鏡的顯微鏡、顯微操作器、顯微工具制作器、微電極拉制儀(拉針儀)、磨針儀、煅針儀、拋光儀、顯微注射儀等。
微電極拉制儀(拉針儀)也有許多種,如垂直重力式電動拉針器、水平式拉針儀和電磁式拉針器等,先將玻璃毛細管加熱到其熔化的溫度,再將其拉制成所需的合適大小的直徑和錐形,微量移液管小頭的直徑(小至0.2微米)與顯微操作器的高精度相關(guān),它可以用于準(zhǔn)確的移液。顯微工具制作器是用來制備微針、微吸管、微刀、微鉤等顯微工具的,它由可調(diào)電熱絲和除去鏡臺的解剖鏡等組合而成,適于針尖的加工。
拋光儀 電極拉制成功后,其表面必須作優(yōu)化處理,如用熱拋光的方法使電極表面光滑,周圍均勻,以提高實驗過程中的封接成功率.
鍛針儀用于顯微注射,可以鍛制成各種各樣的毛細針,適用于不同的應(yīng)用。鍛針儀除了磨光表面外,還可以切斷、彎曲和形成倒鉤,適合鍛制成各種毛細針尖兒端
磨針儀(微電極研磨儀)使用特殊的電機來*小化研磨平面的不規(guī)則運動:確認移液管與研磨平面之間的接觸使得能夠以更高的精度進行研磨。此外,該型號在所有轉(zhuǎn)速下都能提供穩(wěn)定的性能 - 從低精度到高精度,再到高速磨削。易于操作的粗和細移動同軸操縱器配備用于微量移液管的垂直操作,這也使得能夠進行非常準(zhǔn)確的研磨。量角器安裝在移液器支架固定部分上,使得易于設(shè)定所需的研磨角度
注射用電極的尖兒端要求越高,所需處理越復(fù)雜,需選用的配套設(shè)備越多,詳細選擇請致電友誠生物,銷售人員會根據(jù)您的需求為您推薦高性價比的設(shè)備組合。
解剖鏡下操作的設(shè)備:這里所用設(shè)備的精密度沒有顯微鏡下使用的高,可根據(jù)研究對象及研究目的自行設(shè)計。解剖鏡用顯微操作器適用于兩棲類和魚類等卵子的細胞核移植和核酸或基因的卵內(nèi)顯微注射等工作。
顯微操作用儀器應(yīng)根據(jù)具體的實驗材料和實驗?zāi)康募艾F(xiàn)有設(shè)備來選擇,并注意儀器間的配套。
有些在解剖鏡下的實驗操作不需要特殊的顯微操作裝置,可直接用雙手持顯微工具進行。如手持玻璃針在解剖鏡下分離動物胚胎的卵裂球、分離胚胎組織及進行組織塊移植等。